TBEバッファー（トリス-ホウ酸-EDTA緩衝液）の作り方と計算ツール
TBEバッファーとは
TBEバッファー（トリス-ホウ酸-EDTA緩衝液）は、Tris（トリスヒドロキシメチルアミノメタン）、ホウ酸（H₃BO₃）、EDTA（エチレンジアミン四酢酸）からなる緩衝液です。アガロースゲルおよびポリアクリルアミドゲル電気泳動で DNA や RNA を分離する際に広く使用されます。
EDTA は二価カチオン（Mg²⁺ など）をキレートし、DNase 活性を抑制することで核酸の分解を防ぎます。
基本データ
pH（25℃）
約 8.3
pKa（Tris, 25℃）
8.06
構成成分
Tris・ホウ酸・EDTA
計算ツール
調製方法
- Tris
- 0 g
+
- ホウ酸（H₃BO₃）
- 0 g
+
- Na₂EDTA·2H₂O
- 0 g
+
- 純水
- 適量
(全量を 1000 mL に調整)
調製手順
- Tris 0 g、ホウ酸（H₃BO₃） 0 g、EDTA二ナトリウム二水和物（Na₂EDTA·2H₂O） 0 g をそれぞれ量り取る。
- 約 800 mL（調製量より少なめ）の純水に溶解する。
- 純水を加えて全量を 1000 mL に合わせる。
調製時の注意点
- 10x または 5x のストック液を調製し、使用時に純水で希釈する方法が広く用いられています。ストックは室温で保存可能です。
- 緩衝能が高いため、長時間の電気泳動でも pH が安定しやすい特長があります。
