TBS（トリス緩衝生理食塩水）の作り方と計算ツール
TBS（トリス緩衝生理食塩水）とは
TBS（Tris-Buffered Saline、トリス緩衝生理食塩水）は、Tris（トリスヒドロキシメチルアミノメタン）と塩化ナトリウム（NaCl）を主成分とし、塩酸（HCl）で pH を調整した緩衝液です。中性付近に緩衝能を持ち、生体と近い塩濃度を示します。
ウェスタンブロッティング、免疫染色、ELISA など、抗体を用いる実験で広く使用されます。
基本データ
有効 pH 範囲
7.2〜9.0
pKa（25℃）
8.06
構成成分
Tris・塩化ナトリウム
計算ツール
調製方法
- Tris
- 0 g
+
- 塩化ナトリウム（NaCl）
- 0 g
+
- 1 mol/L 塩酸
- 0 mL
+
- 純水
- 適量
(全量を 1000 mL に調整)
調製手順
- Tris 0 g、塩化ナトリウム（NaCl）0 g をそれぞれ量り取る。
- 約 800 mL（調製量より少なめ）の純水に溶解する。
- 1 mol/L 塩酸 約 0 mL を加え、pH メーターで確認しながら目標 pH 7.6 付近に調整する。
- 使用温度（25℃）で pH を確認し、必要に応じて微調整する。Tris は温度依存性が大きいため、実際の使用温度での確認が重要。
- 純水を加えて全量を 1000 mL に合わせる。
- 必要に応じてオートクレーブ滅菌（121℃、20 分）またはフィルター滅菌（0.22 µm）を行う。
調製時の注意点
- 10x ストック液を調製し、使用時に純水で 10 倍希釈する方法が広く用いられています。10x ストックは室温で長期保存可能です。
- Tris の pKa は温度依存性が大きいため（約-0.028/℃）、実際の使用温度で pH を確認・調整してください。
- TBS-T として使用する場合は、Tween 20 を 0.1%（v/v）になるよう添加してください。
